Lowry法蛋白濃度測定試劑盒 NobleRyder P0040
北京諾博萊德科技有限公司供應(yīng)1、Lowry法蛋白濃度測定試劑盒 NobleRyder P0040量大優(yōu)惠,咨詢 :
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Lowry法蛋白濃度測定試劑盒
試劑盒組成 | 包裝(1000微孔) | 保存 |
Folin酚甲試劑A | 100ml×2 | 2-8℃ |
Folin酚甲試劑B | 5ml | 2-8℃ |
Folin酚乙試劑(1N) | 20ml | 2-8℃ |
PBS稀釋液 | 30ml | 2-8℃ |
BSA蛋白標準 (5mg/ml BSA) | 1ml | -20℃ |
本試劑盒自訂購之日起一年內(nèi)有效。本試劑盒用于酶標板或者200ul比色皿時可做1000孔。當使用2ml比色皿時可做100孔,如果是1ml比色皿時可做200孔。
產(chǎn)品簡介
Folin-酚試劑法包括兩步反應(yīng):*步是在堿性條件下,蛋白質(zhì)與銅作用生成蛋白質(zhì)-銅絡(luò)合物;第二步是此絡(luò)合物將Folin試劑還原,產(chǎn)生深藍色,顏色深淺與蛋白質(zhì)含量成正比。定量范圍為5~100μg/ml蛋白質(zhì)。Folin試劑顯色反應(yīng)由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起,因此樣品中若含有酚類、檸檬酸和巰基化合物均有干擾作用。此外,不同蛋白質(zhì)因酪氨酸、色氨酸含量不同而使顯色強度稍有不同。
使用說明
一,酶標儀法
1. 根據(jù)需要量,將Folin酚甲試劑A和Folin酚甲試劑B按50:1混合,其有效期為24小時,過期失效。
2. 稀釋標準品:取10微升BSA標準品用PBS稀釋至100微升(標準品一般可用PBS稀釋),使終濃度為0.5mg/ml。將標準品按0, 2, 4,6,8, 12, 16, 20微升加到96孔板的蛋白標準品孔中,加PBS補足到20微升。
3. 將樣品作適當稀釋(多做幾個梯度,如作2倍、4倍、8倍稀釋),加20微升到96孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量時的誤差,標準線前面的點可能不很準確,所以盡可能的讓樣品點落在標準線1/2后。
4. 將配好的Folin酚甲試劑每孔加入200微升,輕輕震動,混勻,室溫放置10分鐘。
5. 各孔加入20微升Folin酚乙試劑,迅速混勻,37℃放置30分鐘。用酶標儀測定A650,根據(jù)標準曲線計算出蛋白濃度。
6. 使用溫箱孵育時,應(yīng)注意防止因水粉蒸發(fā)影響檢測結(jié)果。
二,分光光度計法
如沒有酶標儀,可用分光光度計在離心管中混勻后加入比色皿中比色。步驟如下:
1. 根據(jù)需要量,將Folin酚甲試劑A和Folin酚甲試劑B按50:1混合,其有效期為24小時,過期失效。
2. 稀釋標準品:取10微升BSA標準品用PBS稀釋至100微升(標準品一般可用PBS稀釋),使終濃度為0.5mg/ml。
3. 取八支(或者更多)5ml離心管,標讓號,按下表加入試劑。
離心管號 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7(樣品管1) | 8(樣品管2) | 9(樣品管3) |
標準蛋白BSA | 0 | 40ul | 80ul | 120ul | 160ul | 200ul | 200ul適當稀釋的樣品1 | 200ul適當稀釋的樣品2 | …… |
PBS | 200ul | 160ul | 120ul | 80ul | 40ul | 0 | 0 | 0 | 0 |
Folin酚甲試劑 | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml |
混勻,室溫放置10分鐘 | |||||||||
Folin酚乙試劑 | 200ul | 200ul | 200ul | 200ul | 200ul | 200ul | 200ul | 200ul | 200ul |
4.混勻,37℃放置30分鐘。用分光光度計測定A650
北京諾博萊德科技有限公司位于北京市海淀區(qū),是一家專業(yè)從事生化試劑、分子生物學(xué)試劑、實驗耗材及實驗儀器研發(fā)、銷售、服務(wù)為一體的生物科技公司,公司主要經(jīng)營的進口品牌包括Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz, Fermantas(MBI), NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等;產(chǎn)品涉及化工原料、生化試劑、分子克隆相關(guān)試劑、細胞培養(yǎng)及檢測常用試劑、實驗室常用耗材及儀器。
Lowry法蛋白濃度測定試劑盒 NobleRyder P0040