Qiagen試劑盒203203/203205/203207/203209
高特異性擴(kuò)增,所需優(yōu)化次數(shù)少?所需優(yōu)化次數(shù)少?PCR特異性高?操作方便,可在室溫下構(gòu)建反應(yīng)體系Qiagen試劑盒203203/203205/203207/203209
Qiagen試劑盒203203/203205/203207/203209
高特異性擴(kuò)增,所需優(yōu)化次數(shù)少
所需優(yōu)化次數(shù)少
PCR特異性高
操作方便,可在室溫下構(gòu)建反應(yīng)體系
不同于抗體介導(dǎo)的方法,HotStarTaq DNA Polymerase應(yīng)用化學(xué)介導(dǎo)的熱啟動(dòng),可確保聚合酶在PCR初始加熱階段*沒(méi)有活性。HotStarTaq DNA Polymerase提供*的QIAGEN PCR Buffer,將非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物、引物二聚體和其他污染降至**。一種新型的添加劑Q-Solution,可實(shí)現(xiàn)難擴(kuò)增的模板(如GC含量高的模板)高效擴(kuò)增。
Performance
每一批HotStarTaq DNA Polymerase都經(jīng)過(guò)*的質(zhì)量控制測(cè)試,包括:嚴(yán)格的PCR特異性和具有可重復(fù)性的試劑,即使低拷貝的靶分子也可擴(kuò)增。通過(guò)檢測(cè),HotStarTaq DNA Polymerase可確保高度特異性和在熱啟動(dòng)PCR中的表現(xiàn)(參見(jiàn)"Higher specificity with different primer–template systems"、"Superior performance"和表格)。該試劑盒提供的新型PCR緩沖液使得在多種PCR條件下都維持高特異性,無(wú)需優(yōu)化(參見(jiàn)"Tolerance to variable magnesium concentration")。試劑盒中的Q-Solution可進(jìn)一步優(yōu)化PCR(參見(jiàn)"Amplification of difficult templates")??傊@些組合確保了在多種應(yīng)用中的特異性擴(kuò)增(參見(jiàn)"Effect of hot start on RT-PCR performance"和"Highly sensitive single-cell PCR")。
Qiagen試劑盒203203/203205/203207/203209
HotStarTaq DNA Polymerase | Supplier AII提供的熱啟動(dòng)酶 | 抗體介導(dǎo) | 手動(dòng) | 蠟屏障 | |
---|---|---|---|---|---|
特異性擴(kuò)增 | ++ | + | + | +/– | +/– |
PCR優(yōu)化需求 | ++ | +/– | +/– | – | – |
易用性 | ++ | ++ | + | – | – |
HotStarTaq DNA Polymerase特性
濃度:5 units/µl
重組酶:是
底物類(lèi)似物:dNTP、ddNTP、dUTP、biotin-11-dUTP、DIG-11-dUTP、fluorescent-dNTP/ddNTP
延伸速度:72°C條件下2–4 kb/min
酶半衰期:97°C條件下10 min,94°C條件下60 min
擴(kuò)增效率:≥105倍
5'–>3'外切酶活性:是
額外添加A:是
3'–>5' 外切酶活性:否
核酸酶污染:否
蛋白酶污染:否
RNases污染:否
自啟活性:否
Qiagen203203/203205/203207/203209
Principle
HotStarTaq DNA Polymerase,一種經(jīng)修飾的Taq DNA Polymerase,確保熱啟動(dòng)PCR的高度特異性。該試劑盒包括新型的雙陽(yáng)離子PCR緩沖液、Q-Solution和MgCl2。
HotStarTaq DNA Polymerase
HotStarTaq DNA Polymerase以非活性形式提供,常溫下沒(méi)有聚合酶活性。避免PCR構(gòu)建和循環(huán)初始階段低溫條件下非特異性引物的延伸和引物二聚體的形成(參見(jiàn)"Superior performance in hot-start PCR"和"Higher specificity with different primer–template systems")。95°C條件下孵育15分鐘即可激活HotStarTaq DNA Polymerase,這個(gè)步驟可整合入已有的熱循環(huán)程序中。
QIAGEN PCR Buffer
QIAGEN PCR Buffer通過(guò)提高每個(gè)PCR擴(kuò)增退火過(guò)程特異性引物的結(jié)合比例,確保PCR每個(gè)循環(huán)特異性擴(kuò)增(參見(jiàn)"Increased specificity of primer annealing")。*的KCl和(NH4)2SO4平衡組合,使得該緩沖液與傳統(tǒng)的PCR緩沖液相比在很寬的溫度和Mg2+濃度范圍內(nèi)都有嚴(yán)格的引物退火條件和高度的特異性,無(wú)需進(jìn)行耗時(shí)的優(yōu)化(參見(jiàn)"Tolerance to variable magnesium concentration")。
Q-Solution
該產(chǎn)品同時(shí)提供Q-Solution,一種新型的PCR添加劑,通過(guò)更改DNA熔解行為促進(jìn)難擴(kuò)增模板的擴(kuò)增。這種*的試劑可進(jìn)一步優(yōu)化由模板引起的表現(xiàn)不理想的PCR,如過(guò)多的二級(jí)結(jié)構(gòu)和富含GC的模板(參見(jiàn)"Amplification of difficult templates")。不同于DMSO和其他PCR添加劑,Q-Solution的濃度是確定的,沒(méi)有*性,并且保證PCR的純度。而且PCR中加入Q-Solution不會(huì)影響PCR的準(zhǔn)確性。
Procedure
HotStarTaq DNA Polymerase提供高效、經(jīng)優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)方案,用于快速、方便的構(gòu)建PCR反應(yīng)體系。95°C條件下孵育15分鐘激活HotStarTaq DNA Polymerase,可以整合入已有的熱循環(huán)程序。反應(yīng)可在室溫下建立,更加方便和易于使用(參見(jiàn)"HotStarTaq procedure")。
Applications
HotStarTaq DNA Polymerase適合多種應(yīng)用,包括各種富有挑戰(zhàn)性的研究,如各種擴(kuò)增應(yīng)用:
復(fù)雜的基因模板
復(fù)雜的cDNA模板(如RT-PCR)
低拷貝的靶序列(如單細(xì)胞PCR)
多重引物對(duì)反應(yīng)
Qiagen203203/203205/203207/203209
Features | Specifications |
應(yīng)用 | PCR, RT-PCR, Complex genomic templates, very low-copy targets |
酶活 | 5' -> 3' exonuclease activity |
預(yù)混液 | No |
反應(yīng)類(lèi)型 | PCR amplification |
real-time或終點(diǎn)法PCR | Endpoint |
樣本/目標(biāo)類(lèi)型 | Genomic DNA and cDNA |
單一或多重 | Single |
有/無(wú)熱啟動(dòng)酶 | With hotstart |
相關(guān)產(chǎn)品 | |||
商品編號(hào) | 商品品名 | 規(guī)格 | 品牌 |
203205 | 熱啟動(dòng)PCR DNA聚合酶 | 1000U | Qiagen |
203203 | 熱啟動(dòng)PCR DNA聚合酶 | 250U | Qiagen |
203209 | 熱啟動(dòng)PCR DNA聚合酶 | 25000U | Qiagen |
203207 | 熱啟動(dòng)PCR DNA聚合酶 | 5000U | Qiagen |