凱杰Qiagen快速亞**氫鹽轉(zhuǎn)化試劑盒 50T
59824 凱杰Qiagen快速亞**氫鹽轉(zhuǎn)化試劑盒 50T EpiTect Fast DNA Bisulfite Kit ,產(chǎn)品介紹:產(chǎn)品品牌:Qiagen產(chǎn)品貨號(hào):59824 產(chǎn)品名稱:快速亞**氫鹽轉(zhuǎn)化試劑盒 英文名稱:EpiTect Fast DNA Bisulfite Kit 產(chǎn)品規(guī)格:50T
凱杰Qiagen59824快速亞**氫鹽轉(zhuǎn)化試劑盒EpiTect Fast DNA Bisulfite Kit 50T
凱杰QIAGEN在生命科學(xué)研究、應(yīng)用檢測(cè)、制藥、和分子診斷領(lǐng)域獲得成功和突破性進(jìn)展。
59824 凱杰Qiagen快速亞**氫鹽轉(zhuǎn)化試劑盒 50T EpiTect Fast DNA Bisulfite Kit ,產(chǎn)品介紹:
產(chǎn)品品牌:Qiagen
產(chǎn)品貨號(hào):59824
產(chǎn)品名稱:快速亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化試劑盒
英文名稱:EpiTect Fast DNA Bisulfite Kit
產(chǎn)品規(guī)格:50T
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59824 凱杰Qiagen快速亞**氫鹽轉(zhuǎn)化試劑盒 50T EpiTect Fast DNA Bisulfite Kit ,產(chǎn)品說(shuō)明:
特征
優(yōu)化的程序可實(shí)現(xiàn)超過(guò) 99% 的高胞嘧啶轉(zhuǎn)化率
在短短 30 分鐘內(nèi)實(shí)現(xiàn)高效亞**氫鹽轉(zhuǎn)化
gDNA、全血、細(xì)胞、組織和FFPE切片的專用解決方案
快速、簡(jiǎn)化的程序,可在 96 孔板中高效轉(zhuǎn)換和純化 DNA
du特的DNA保護(hù)技術(shù)可防止DNA降解
凱杰Qiagen快速亞**氫鹽轉(zhuǎn)化試劑盒 50T
產(chǎn)品詳情
EpiTect 快速亞**氫鹽轉(zhuǎn)化試劑盒是一個(gè)協(xié)調(diào)的試劑盒系統(tǒng),可在短短 30 分鐘內(nèi)將未甲基化的胞**高效轉(zhuǎn)化為尿mi啶,同時(shí)在起始材料的選擇方面具有出色的靈活性。簡(jiǎn)化的樣品裂解程序和從全血、培養(yǎng)細(xì)胞、組織樣本、基因組 DNA 和福爾馬林固定石蠟包埋 (FFPE) 切片中直接轉(zhuǎn)化 DNA,使亞硫酸氫鹽快速、輕松地進(jìn)行高效轉(zhuǎn)化。創(chuàng)新的 DNA 保護(hù)技術(shù)可確保有效的 DNA 變性而不會(huì)降解,從而實(shí)現(xiàn)高 DNA 產(chǎn)量和可重復(fù)的結(jié)果。離心柱程序可以在QIAcube Connect上自動(dòng)化。該程序采用 96 孔形式,可實(shí)現(xiàn) DNA 的超快速、高通量亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化,并可使用離心機(jī)或真空歧管進(jìn)行處理。
Performance
高效亞**氫鹽轉(zhuǎn)化
亞硫酸氫鹽處理DNA以及由此產(chǎn)生的未甲基化胞嘧啶轉(zhuǎn)化為尿mi啶是甲基化分析中*關(guān)鍵的步驟,因?yàn)榉磻?yīng)效率將極大地影響下游分析的可靠性。EpiTect 快速亞**氫鹽轉(zhuǎn)化試劑盒包含創(chuàng)新的亞**氫鹽溶液,即使在難以分析的樣品(例如源自女性樣本的 X 染色體基因組 DNA)上也能實(shí)現(xiàn)超快速、高效的亞**氫鹽轉(zhuǎn)化,其中 2 條 X 染色體中的一條高度甲基化.通過(guò)焦磷酸測(cè)序?qū)蝹€(gè)胞嘧啶轉(zhuǎn)化的定量表明,與其他供應(yīng)商的試劑盒相比,EpiTect 快速亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化試劑盒可實(shí)現(xiàn)的轉(zhuǎn)化率明顯更好,尤其是在起始材料量有限的情況下。
減少DNA片段化
亞**氫鹽wan全轉(zhuǎn)化所需的惡劣條件通常會(huì)導(dǎo)致高度的DNA片段化和樣品損失,從而導(dǎo)致DNA產(chǎn)量低,DNA高度片段化和轉(zhuǎn)化率不重復(fù)。QIAGENdu特的DNA保護(hù)緩沖液可防止DNA降解,從而產(chǎn)生wan全轉(zhuǎn)化的DNA,其片段大小比其他供應(yīng)商的試劑盒大得多。為方便起見(jiàn),預(yù)混液可儲(chǔ)存在 2–8°C。
Principle
樣品DNA的快速和wan全亞**氫鹽轉(zhuǎn)化對(duì)于準(zhǔn)確的DNA甲基化分析至關(guān)重要。EpiTect 快速亞**氫鹽轉(zhuǎn)化試劑盒包括一種創(chuàng)新的亞**氫鹽解決方案,可在短短 30 分鐘內(nèi)實(shí)現(xiàn)高效的亞**氫鹽轉(zhuǎn)化。簡(jiǎn)化的樣品裂解和轉(zhuǎn)化方案可實(shí)現(xiàn)DNA的高效純化和亞**氫鹽轉(zhuǎn)化,而du特的DNA保護(hù)技術(shù)可最大限度地減少亞**氫鹽處理過(guò)程中的DNA片段化。3 個(gè) EpiTect 快速亞**氫鹽轉(zhuǎn)化試劑盒和 EpiTect 快速 96 亞**氫鹽轉(zhuǎn)化試劑盒相互連接,可作為從各種起始材料直接轉(zhuǎn)化 DNA 的集成解決方案系統(tǒng)。然而,每個(gè)試劑盒都有du特的功能,適用于特定的樣品類型,并包括獨(dú)立運(yùn)行所需的所有緩沖液和試劑。每個(gè)試劑盒中的組分相結(jié)合,可有效裂解樣品,*大限度地減少裂解過(guò)程中的DNA損失,wan全亞**氫鹽轉(zhuǎn)化,在轉(zhuǎn)化過(guò)程中提供強(qiáng)大的保護(hù),并對(duì)DNA進(jìn)行che底純化。
亞**氫鹽快速轉(zhuǎn)化
EpiTect 快速亞**氫鹽轉(zhuǎn)化試劑盒為高效轉(zhuǎn)化和純化從基因組 DNA、FFPE、血液、細(xì)胞或組織樣品制備的 DNA 提供了一種非??焖俸秃?jiǎn)化的程序。該試劑盒含有高濃度的亞**氫鹽溶液,可將未甲基化胞嘧啶殘基轉(zhuǎn)化為尿mi啶所需的時(shí)間從幾個(gè)小時(shí)縮短到短短 30 分鐘,以及無(wú)需在亞**氫鹽處理前分離 DNA 的制備緩沖液。此外,亞**氫鹽熱循環(huán)程序提供了熱DNA變性以及隨后的磺化和胞嘧啶脫氨所需的一系列優(yōu)化孵育步驟,可實(shí)現(xiàn)超過(guò)99%的高胞嘧啶轉(zhuǎn)化率。脫磺是胞嘧啶化學(xué)轉(zhuǎn)化的最后一步,通過(guò)純化過(guò)程中的便捷柱上步驟實(shí)現(xiàn)。
DNA保護(hù)緩沖液
樣品DNA的快速和wan全亞**氫鹽轉(zhuǎn)化是正確測(cè)定甲基化模式的*關(guān)鍵步驟。這是通過(guò)在高溫和低pH值下在高亞**氫鹽濃度下孵育DNA來(lái)實(shí)現(xiàn)的。這些惡劣的條件通常會(huì)導(dǎo)致高度的DNA片段化和隨后的DNA在純化過(guò)程中的損失。常見(jiàn)的亞**氫鹽程序通常需要大量的起始DNA來(lái)補(bǔ)償轉(zhuǎn)化過(guò)程中的DNA降解和純化過(guò)程中的DNA損失,這通常會(huì)導(dǎo)致DNA產(chǎn)量低,DNA高度碎片化和轉(zhuǎn)化率不可重復(fù)。借助 EpiTect 快速亞**氫鹽轉(zhuǎn)化試劑盒,du特的 DNA 保護(hù)緩沖液可防止亞**氫鹽轉(zhuǎn)化過(guò)程中的 DNA 片段化,該緩沖液經(jīng)過(guò)du特配制,可防止通常在高溫和低 pH 值下處理 DNA 的亞**氫鹽相關(guān)的片段化。它還提供有效的DNA變性,從而產(chǎn)生wan全胞嘧啶轉(zhuǎn)化所需的單鏈DNA。DNA保護(hù)緩沖液還含有一種方便的pH指示染料作為混合對(duì)照,可確認(rèn)胞嘧啶轉(zhuǎn)化的正確pH值。
FFPE樣品的脫蠟
從FFPE樣品中提取DNA的第一步是脫蠟,即首先溶解石蠟,然后除去石蠟,暴露樣品以隨后用裂解緩沖液和蛋白酶K處理。借助 EpiTect 快速 FFPE 亞**氫鹽試劑盒,FFPE 切片的脫蠟、裂解和脫交聯(lián)通過(guò)脫蠟解決方案進(jìn)行了優(yōu)化,這是一種創(chuàng)新的化學(xué)方法,能夠以最少的處理方式促進(jìn)脫蠟。脫蠟溶液有助于提高DNA回收率,因?yàn)樗谶M(jìn)行蛋白酶K消化時(shí)會(huì)保留在樣品上。無(wú)需沉淀FFPE樣品或去除含石蠟的上清液,避免了脫蠟過(guò)程中樣品損失的風(fēng)險(xiǎn)。
Procedure
EpiTect 快速亞**氫鹽轉(zhuǎn)化試劑盒程序包括幾個(gè)簡(jiǎn)單的步驟:從樣品中制備 DNA,亞**氫鹽介導(dǎo)的未甲基化胞嘧啶轉(zhuǎn)化;將轉(zhuǎn)化的單鏈DNA結(jié)合到MinElute DNA離心柱的膜或EpiTect 96板的膜上;洗滌;膜結(jié)合DNA的脫磺化;洗滌膜結(jié)合的DNA以除去脫磺劑;以及從離心柱或 96 孔板中洗脫純的轉(zhuǎn)化 DNA。FFPE切片、全血、細(xì)胞培養(yǎng)物或組織的樣品制備不同,而所有樣品類型的亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化提取DNA的程序都相同。所有方案均實(shí)現(xiàn)相同的胞嘧啶轉(zhuǎn)化率,并在純化轉(zhuǎn)化后的DNA后獲得相同的DNA回收率,與DNA起始量無(wú)關(guān)。
試劑盒描述
EpiTect 快速 DNA 亞**氫鹽試劑盒和 EpiTect 快速 96 DNA 亞**氫鹽試劑盒
EpiTect 快速 DNA 亞**氫鹽試劑盒包括精心配制的緩沖液和試劑,可提供基因組 DNA 的簡(jiǎn)化和有效的亞**氫鹽轉(zhuǎn)化,并隨后對(duì)轉(zhuǎn)化后的 DNA 進(jìn)行純化。新型亞**氫鹽溶液可在短短 30 分鐘內(nèi)完成亞**氫鹽轉(zhuǎn)化,而 DNA Protect 技術(shù)和 QIAGEN 離心柱或 96 孔板允許以*小的降解生成wan全轉(zhuǎn)化的 DNA,可在低至 10 μl 緩沖液中洗脫,適用于需要高 DNA 濃度的下游應(yīng)用。EpiTect 快速 DNA 亞**氫鹽試劑盒可用于轉(zhuǎn)化 1 ng–2 μg DNA,體積高達(dá) 20 μl,或*大體積為 1 μl 的 500–40 ng。
EpiTect Fast FFPE Bisulfite Kit
福爾馬林固定的石蠟包埋 (FFPE) 組織使用 EpiTect 快速 FFPE 亞**氫鹽試劑盒進(jìn)行處理,該試劑盒由 EpiTect 快速 FFPE 裂解試劑盒和 EpiTect 快速 DNA 亞**氫鹽試劑盒組成,前者包含用于高效脫石蠟和裂解 FFPE 組織切片的專用緩沖液,后者可快速有效地轉(zhuǎn)化提取的 DNA。該方案包括一個(gè)優(yōu)化的步驟,以促進(jìn)DNA的結(jié)合,并且可以用于FFPE組織的單片(厚度為10μm)。從FFPE組織中提取DNA時(shí)不可避免地發(fā)生的DNA片段化因隨后亞**氫鹽處理的惡劣條件而變得更糟。QIAGEN可靠的DNA保護(hù)技術(shù)*大限度地減少了轉(zhuǎn)化反應(yīng)過(guò)程中的片段化,從而提高了亞**氫鹽轉(zhuǎn)化DNA的產(chǎn)量。
EpiTect 快速裂解全亞硫酸氫鹽試劑盒(僅限離心柱形式)
全血、培養(yǎng)細(xì)胞或組織樣品使用EpiTect快速裂解全亞**氫鹽試劑盒進(jìn)行處理,該試劑盒由EpiTect快速裂解全亞**氫鹽試劑盒和創(chuàng)新的裂解緩沖液和EpiTect快速DNA亞**氫鹽試劑盒組成,用于提取的DNA的亞**氫鹽轉(zhuǎn)化。該方案包括一個(gè)優(yōu)化的步驟,以促進(jìn)DNA的結(jié)合以及du特配方的裂解緩沖液,以簡(jiǎn)化樣品中DNA的釋放。該試劑盒可用于 0.5-20 μl 血液或 10-105 個(gè)細(xì)胞(低至 60 pg DNA)。
Applications
EpiTect 快速亞**氫鹽轉(zhuǎn)化試劑盒可從各種起始材料快速高效地轉(zhuǎn)化 DNA,非常適合目前用于 DNA 甲基化分析的所有技術(shù),包括:
l PCR:終點(diǎn)、實(shí)時(shí)和甲基化特異性
l 亞**氫鹽測(cè)序(直接和克隆)
l COBRA(聯(lián)合亞**氫鹽限制性分析)
l 焦磷酸測(cè)序
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